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目的本实验观察黄连含药血清对巨噬细胞(MΦ)、M1/M2型MΦ及泡沫细胞炎症因子的影响,探讨黄连治疗动脉粥样硬化AS机制,为黄连临床用药提供实验依据。方法1提取小鼠骨髓源单核细胞,诱导其分化为MΦ、M1/M2型MΦ及泡沫细胞,流式细胞仪和油红O染色鉴定细胞特征。2采用黄连高、中、低剂量水煎剂灌胃干预SD大鼠,常规制备含药血清。经MTT法筛选适当浓度含药血清分别与MΦ、M1/M2型MΦ及泡沫细胞共同孵育24H。3ELISA法测定细胞上清液中TNFΑ和TGFΒ含量流式细胞仪检测CD16/32、CD206的表达。结果1与正常血清对照组比较低剂量含药血清干预组中M1/M2型MΦ分泌TNFΑ显著降低(P<005)、分泌TGFΒ显著升高(P<001)MΦ分泌TNFΑ、TGFΒ显著升高P<001。中剂量含药血清干预组M1型MΦ分泌TNFΑ显著升高P<001M2型MΦ和MΦ分泌TNFΑ显著降低P<001、TGFΒ显著升高P<001。高剂量含药血清干预组M1型MΦ分泌TGFΒ显著降低P<001M2型MΦ分泌TNFΑ显著升高P<005。黄连高、中、低剂量含药血清均促进泡沫细胞分泌TGFΒ,而对TNFΑ分泌无显著差异。2含药血清组相互比较低剂量干预组中M1型MΦ分泌TNFΑ显著降低P<001、TGFΒ显著升高P<005MΦ与泡沫细胞分泌TGFΒ显著升高P<001。中剂量干预组M1型MΦ分泌TGFΒ显著升高P<001,MΦ和泡沫细胞分泌TNFΑ显著降低P<005、分泌TGFΒ显著升高P<001。中、低剂量组M2型MΦ分泌TNFΑ显著降低P<001、TGFΒ显著升高P<001。3在MΦ、M1型MΦ中,高、中、低剂量黄连含药血清组表达CD206显著升高。而M2型MΦ、泡沫细胞中,高、中、低剂量黄连含药血清组表达CD206变化不明显。说明黄连含药血清可以促进MΦ、M1型MΦ向M2型巨噬细胞分化,增强其抗炎机制。而对M2型MΦ、泡沫细胞的分化则不显著。4在M2型MΦ、泡沫细胞中,高、中、低剂量黄连含药血清组表达CD16/32显著降低在MΦ中,高、中剂量黄连含药血清组表达CD16/32显著降低M1型MΦ中,高、中、低剂量含药血清干预组表达CD16/32则不显著。说明黄连含药血清可以抑制MΦ、M2型MΦ、泡沫细胞向M1型巨噬细胞分化,降低其抑炎作用。而对M1型MΦ的分化不显著。结果表明,低剂量黄连含药血清可以最大限度的促进MΦ表达CD206,中剂量含药血清可以最大限度促进M1型MΦ表达CD206,进而增加它们的抗炎作用。中剂量黄连含药血清可以最大限度的抑制MΦ表达CD16/32,低剂量含药血清可以最大限度抑制M2型MΦ及泡沫细胞表达CD16/32,降低它们的抑炎作用。结论1在MΦ中,低剂量黄连含药血清干预组能促进TGFΒ及CD206的表达中剂量含药血清干预组能抑制TNFΑ、CD16/32表达,促进TGFΒ、CD206表达。2在M1型MΦ中,低剂量黄连含药血清干预组能抑制TNFΑ分泌,促进TGFΒ及CD206的表达中剂量黄连含药血清干预组能够促进TNFΑ及CD206的表达高剂量含药血清干预组可以抑制TGFΒ分泌,促进CD206表达。在M2型MΦ中,低剂量黄连含药血清干预组能抑制TNFΑ、CD16/32表达,促进TGFΒ分泌中剂量黄连含药血清干预组能抑制TNFΑ、CD16/32分泌,促进TGFΒ分泌高剂量含药血清干预组能抑制CD16/32表达,促进TNFΑ分泌。3在泡沫细胞中,高、中、低剂量含药血清均能促进TGFΒ分泌,抑制CD16/32表达。不同剂量的黄连含药血清对巨噬细胞和泡沫细胞极化后TNFΑ、TGFΒ、CD16/32和CD206的表达各有差异,这反应了中药药理效应及成分的复杂性,可以推测出黄连对炎症因子的分泌具有一定调节作用,从而为临床治疗AS提供了相应实验依据。